綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
婁地青霉品牌 | Penicilliu | EY-J963653 |
資源名稱: 婁地青霉
種屬: Penicillium roqueforti
分離基物: 法國(guó)羊乳干酪
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: yes
培養(yǎng)基: CPDA
生長(zhǎng)條件: 28℃,好氧,3d
存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
Roseovarius│sp. 中文名稱:玫瑰變色菌Roseovarius│sp.分離基物:土壤/鹽漬土提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:端微生物/耐鹽菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Marinobacr│guineae 中文名稱:吉氏海桿菌Marinobacr│guineae分離基物:樣/次表層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Staphylococcus│cohnii 中文名稱:科氏葡萄球菌Staphylococcus│cohnii分離基物:樣/次底層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>95%(HPLC)
Brachybacrium│sp. 中文名稱:短狀桿菌Brachybacrium│sp.分離基物:樣/次表層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Micrococcus│antarcticus 中文名稱:南微球菌Micrococcus│antarcticus分離基物:樣/表層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Vibrio│nereis 中文名稱:海蛹弧菌Vibrio│nereis分離基物:樣/深層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Winogradskyella│sp. 中文名稱:維諾格拉斯基氏菌Winogradskyella│sp.分離基物:樣/表層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20-25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Myroides│sp. 中文名稱:類香味菌Myroides│sp.分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
婁地青霉品牌PKC beta 1/2 蛋白激酶C beta 1/2抗體白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ2--4-甲基-5-硝基吡Human GADL1 (Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit
phospho-PKC (Thr500) 磷化蛋白激酶C(T500)抗體白術(shù)內(nèi)酯III2--4-甲基-5-硝基吡Human GAD1 (Glutamate Decarboxylase 1) ELISA Kit
phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 磷化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗體蟾靈2--4-甲基-5-硝基吡Human PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit
Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 磷化蛋白激酶C α/β2抗體根皮素2--4-硝基吡Human PPAR-δ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta) ELISA Kit
PKC alpha 蛋白激酶C α抗體2--4-硝基吡Human NUP62 (Nucleoporin 62kDa) ELISA Kit
PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體大葉茜草素2--4-硝基吡Human PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit
Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217) 磷化磷酯酶Cγ2抗體皂苷A2--5-甲基-3-硝基吡Human RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B) ELISA Kit
Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷化磷酯酶Cγ2抗體羥基A2--5-甲基-3-硝基吡Human NUMA1 (Nuclear Mitotic Apparatus Protein 1) ELISA Kit