細胞名稱 家兔皮膚細胞;DR-S1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雌性黑家兔的皮膚組織。2004年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
家兔皮膚細胞;DR-S1 | 貼壁生長 | EY-X63776 |
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
抗凝血素抗體IgG檢測試劑盒細胞名稱: BALB/C小鼠肝上皮細胞;BNL1MEA.7R.1形態(tài)特性: 上皮樣anti-prothrombins antibodies IgG
抗去唾液糖蛋白受體抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人鱗癌細胞(高分化);HCC-94[HCC941122;HCC94]形態(tài)特性: 上皮樣anti-asialoglyco protein receptor antibody
抗上皮細胞生長抑制因子檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠畸胎瘤細胞;F9形態(tài)特性: 上皮樣Antiproliferative Factor
抗神經(jīng)元核抗體1型;抗Hu抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810形態(tài)特性: 上皮樣neuronal nuclear autoantibody
抗腎小球基底膜抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人胃癌細胞;HGC-27形態(tài)特性: 上皮樣glomerular basement membrane antibogy
抗體免疫球蛋白A檢測試劑盒細胞名稱: 人卵巢癌細胞;HO-8910形態(tài)特性: 上皮樣Immunoglobulin A
抗天然脫氧核糖核抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞;HO-8910PM形態(tài)特性: 上皮樣natural deoxyribonucleic acid antibody
抗纖維蛋白抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人肺鱗癌細胞;LTEP-s形態(tài)特性: 多邊形上皮細胞樣anti-fibrillarin antibody
抗信號識別顆粒抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移);KP-N-NS形態(tài)特性: 上皮樣signal recognization particle antibody
抗胸腺細胞球蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤;M5076形態(tài)特性: 梭形anti-thymocyte globulin
抗血小板IgA抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人神經(jīng)母細胞瘤細胞;IMR-32形態(tài)特性: 存在兩種細胞類型,小的神經(jīng)母細胞樣細胞和大的透明成纖維樣細胞platelet antibodies IgA
抗乙型肝炎病表面抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人小細胞肺癌細胞;LTEP-sm形態(tài)特性: 上皮樣,多邊形及圓形細胞anti-hepatitis B virus surface antibody
抗載脂蛋白抗體A1檢測試劑盒細胞名稱: 牛腎細胞;MDBK形態(tài)特性: 上皮樣apoprotein A1 antibody
顆粒溶素檢測試劑盒細胞名稱: 人腎上腺腺瘤細胞;NCI-H295形態(tài)特性: 上皮細胞樣granulysin
顆粒體蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]形態(tài)特性: 神經(jīng)和阿米巴樣干細胞Granulin
可溶程序性死亡分子-1檢測試劑盒細胞名稱: 人腎癌細胞;OS-RC-2形態(tài)特性: 上皮樣soluble programmed death-1
可溶性CD163分子檢測試劑盒細胞名稱: 人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞;RD形態(tài)特性: 梭型和大的多核細胞soluble CD163
家兔皮膚細胞;DR-S1肉湯培養(yǎng)基I規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。
抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅱ(PH7.8-8.0)規(guī)格:BR250g詳情介紹
霉素麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于真菌的分離培養(yǎng)
改良月桂基硫鹽胰蛋白胨肉湯-(mLST-VM)規(guī)格:用途:1mg每支含量
MLCB寒天培地顆粒規(guī)格:250g拉丁屬名:MLCB Agar
梭菌鑒別瓊脂(DCA)規(guī)格:250g用途:用于干燥食品亞硫鹽還原梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)