綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
?
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種說(shuō)明書(shū) | Bacillus t | EY-J963744 |
資源名稱(chēng): 蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種
種屬: Bacillus thuringiensis subsp. kenyae
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 生物防治(粘蟲(chóng)、菜青蟲(chóng)、松毛蟲(chóng))
培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
二甲藍(lán)有效期: 2年溶解性: 1 mg/mL in war別名: 性藍(lán)1;藍(lán)1英文名稱(chēng): Xylene blue
對(duì)稱(chēng)二硫脲別名: 硫化促進(jìn)劑DPTU;二基甲硫促進(jìn)劑CA;促進(jìn)劑CA;均二硫脲;二基硫脲;N,N'-對(duì)稱(chēng)二基硫脲;二硫脲;S-二基硫脲;N,N-二基硫脲;CAS: 102-08-9分子式: C13H12N2S分子量: 228.31
6有效期: 3年溶解性: 2mg/ml DMSO別名: 3-(2'-并噻唑基)-7-二乙基氨基英文名稱(chēng): Coumarin 6
5-氨基乙酰丙鹽鹽有效期: 2年溶解性: 25mg/mL in war英文名稱(chēng): 5-Aminolevulinic acid hydrochlorideCAS: 5451-09-2
甲基-α-D-吡喃半乳糖苷有效期: 3年英文名稱(chēng): Methyl α-D-glucopyranosideCAS: 97-30-3分子式: C7H14O6
2,5-雙(5-叔丁基-2-并惡唑基)噻吩有效期: 1年溶解性: 10 mg/mL in DMF別名: 2,2-(2,5-二基硫代)雙[5-(1,1-二甲基乙基)]并惡唑;熒光增白劑OB;熒光增白劑184;2,5-雙(5-叔丁基-1,3-并噁唑-2-基)噻酚英文名稱(chēng): BBOT
英文名稱(chēng): Castor oilCAS: 8001-79-4儲(chǔ)存條件: RT外觀(性狀): 淡黃色粘性液體
醋阿拉瑞林CAS: 79561-22-1單位: 瓶其它:
注意:
1.本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和操作。
蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種說(shuō)明書(shū)AFP/AP 性磷酶標(biāo)記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱氨和絲氨富含核蛋白1)1,2-苯并異噻唑啉-3-(BIT)Mouse HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit
BNP/Biotin 化腦鈉肽抗體有絲分裂激酶A/B/C抗體L-絲氨乙酯鹽鹽Mouse ID(deiodinase) ELISA Kit
Phospho-HSP27 (Ser15) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化熱休克蛋白27抗體IgG蛋白酪氨激酶ATK抗體L-絲氨乙酯鹽鹽Mouse IgG-Fc ELISA Kit
Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 熒光素標(biāo)記磷化熱休克蛋白27抗體IgG長(zhǎng)鏈脂肪連接酶1/2抗體1-溴-3,4-(亞甲基二氧基)苯Mouse IgA (Immunoglobulin A) ELISA Kit
Phospho-HSP27 (Ser82)/FITC 熒光素標(biāo)記磷化熱休克蛋白27抗體IgG過(guò)氧化物酶?;趸?抗體1-溴-3,4-(亞甲基二氧基)苯Mouse IgE (Immunoglobulin E) ELISA Kit
Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7)/FITC 熒光素標(biāo)記磷化熱休克蛋白90α抗體IgG膽固酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體1-溴-3,4-(亞甲基二氧基)苯Mouse IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit
Beta-arrestin 1/FITC 熒光素標(biāo)記β-抑制蛋白1抗體IgG磷化間變型淋巴瘤激酶抗體2-巰基吡Mouse IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit
Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化β抑制蛋白1抗體IgG磷化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體2-巰基吡Mouse IgG2a (Immunoglobulin G2a) ELISA Kit