細胞名稱 大耳山羊腎細胞；LDG-2
形態(tài)特性: 上皮樣,多角形
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性大耳山羊的腎組織。1990年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
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產(chǎn)品名稱 | 大耳山羊腎細胞；LDG-2 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63765 |
產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
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UL16結合蛋白-2檢測試劑盒細胞名稱: 人喉癌上皮細胞；Hep-2形態(tài)特性: 上皮樣UL16 Binding Protein 2
UL16結合蛋白-3檢測試劑盒細胞名稱: 人黑色素瘤細胞；A875形態(tài)特性: 多角形ULBP-3
Vasorin;SLIT-like 2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠原B細胞株；BaF3形態(tài)特性: 圓形Vasorin;SLIT-like 2
X盒結合蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠腦瘤細胞；BC3H1形態(tài)特性: 多角X-Box Binding Protein 1
X-連鎖凋亡抑制蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 敘利亞倉鼠腎細胞；BHK-21形態(tài)特性: 成纖維細胞樣XIAP
Yes關聯(lián)蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞；BS-C-1形態(tài)特性: 上皮樣Yes Associated Protein
ZBED3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠成肌細胞；C2C12形態(tài)特性: 成纖維細胞樣；梭形Zinc finger BED domain-containing protein 3
ZNF3基因檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞；Caco-2形態(tài)特性: 上皮樣ZNF3
α;β干擾素受體檢測試劑盒細胞名稱: 人上皮細胞；CaSki[CaSki]形態(tài)特性: 上皮樣Interferon α;β Receptor
α2-HS糖蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人髓母細胞瘤細胞；D341Med形態(tài)特性: 圓形alpha-2-HS-Glycoprotein
α2抗纖溶酶檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞；HCT-8[HRT-18]形態(tài)特性: 上皮樣Alpha 2 antiplasmin
α-N-乙酰-半乳糖氨酶檢測試劑盒細胞名稱: 人內(nèi)膜腺癌細胞；HEC-1-B[HEC-1B;HEC1B]形態(tài)特性: 上皮樣N-Acetyl Galactosaminidase, alpha
α-輔肌動蛋白4檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠肝癌細胞；Hepa1-6[Hepa1-6]形態(tài)特性: 上皮樣alpha Actinin 4
α甘露糖苷酶檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞；SK-BR-3形態(tài)特性: 上皮樣α mannosidase
α干擾素抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人胚肺成纖維細胞；CCC-HPF-1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Interferon α antibody
α唾液檢測試劑盒細胞名稱: 豬腎細胞；LLC-PK1形態(tài)特性: 上皮樣Salivary alpha-amyla
α-微管蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠小腸隱窩上皮細胞；IEC-6形態(tài)特性: 上皮樣α-tubulin
大耳山羊腎細胞；LDG-2水解乳蛋白規(guī)格：250g用途：提供細菌生長所需的生長因子
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基（第二代）規(guī)格：1000ml用途：用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)，沙門氏菌顯紫色
O157顯色培養(yǎng)基規(guī)格：1000ml用途：用于O157菌的顯色培養(yǎng)，O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色
HBI志賀氏菌生化鑒定條(GB)規(guī)格：5條/盒用途：用于志賀氏菌的生化鑒定，每條包括：半固體瓊脂、β-半乳糖苷酶(ONPG)、葡萄糖銨、西蒙氏枸櫞鹽、色氨肉湯、賴氨脫羧酶肉湯、鳥氨脫羧酶肉湯、氨基脫羧酶對照、尿素酶、粘液鹽測試肉湯、粘液鹽質(zhì)控肉湯、棉子糖、甘油、、水楊苷、七葉苷共16種生化反應。（GB標準）
化鈉蛋白胨緩沖液規(guī)格：250g用途：用于樣品制備的營養(yǎng)液
肉湯基礎規(guī)格：250g用途：用于蠟樣芽孢桿菌的試驗
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