折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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以下是折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟的詳細(xì)說明書:
產(chǎn)品名稱 | 折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Marteilia refringensPCR |
編號 | EY00P796 |
使用方法:
注:折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
乳酸桿菌選擇性肉湯250g用于軟酸桿菌增菌培養(yǎng)
DTM培養(yǎng)基 DTM Medium 用于食品中真菌的培養(yǎng)
血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基 Blood Agar Base 250克 供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用
支原體肉湯培養(yǎng)基250g/瓶含酚紅,不含,用于支原體的培養(yǎng)(中國藥典)incubationmedia支原體肉湯培養(yǎng)基250g/瓶含酚紅,不含,用于支原體的培養(yǎng)(中國藥典)
MediumI(foeSeedandBasalLayer)
TTCAgarBase
BrucellaAgar
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 250 用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)(SN、GB標(biāo)準(zhǔn))
緩沖李斯特氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性增菌,每225ml培養(yǎng)基中添加incubationmedia緩沖李斯特氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性增菌,每225ml培養(yǎng)基中添加1415
無菌病毒運(yùn)輸液(VTM) 3ml/支*36 用于甲流病毒標(biāo)本運(yùn)送
抗生素檢定培養(yǎng)基6號250g用于粘菌素等的效價(jià)測定
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g) incubation media 普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g)
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 250g 供霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)及分離培養(yǎng)
三號膽鹽于抑制革蘭氏陽性菌的生長incubationmedia三號膽鹽于抑制革蘭氏陽性菌的生長
SC瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng),需天極D-環(huán)和50%卵黃乳液(ISO標(biāo)準(zhǔn))
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0077Eca-109(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Wish細(xì)胞,人羊膜細(xì)胞系 人T細(xì)胞淋巴瘤,Hat-78細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2
BGC823(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EMT-6 小鼠癌
CL-0358HKC(人胚腎上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞(HCSMC)(5×105 )
人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1 大鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201
MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟GHS1 金黃地鼠皮膚成纖維細(xì)胞
GPH4 豚鼠心肌來源細(xì)胞
GPL1 豚鼠肺成纖維樣細(xì)胞
GPS5 豚鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞
需要自備的器材:
1.折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。