鮭魚(yú)立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
?
以下是鮭魚(yú)立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用的詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
產(chǎn)品名稱 | 鮭魚(yú)立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用 |
英文名稱 | Piscirickettsia salmonisPCR |
編號(hào) | EY00P1002 |
使用方法:
注:鮭魚(yú)立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是鮭魚(yú)立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Ke-3 人腎癌細(xì)胞
MDA-MB-436人腺癌細(xì)胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBS
FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
小鼠雪旺細(xì)胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌細(xì)胞 Human
Pcc4 小鼠畸胎瘤細(xì)胞
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 )
急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104 大鼠心肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17
CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NCI-H520 肺鱗癌
NCI-H524 人小細(xì)胞肺癌
NCI-H661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
NCI-N87 人高分化胃癌細(xì)胞
M肉湯 英文名稱; M Broth 規(guī)格; 10ml*20支/包
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯- 英文名稱; Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin 規(guī)格; 10ml*20支/包
李氏增菌肉湯LB2 英文名稱; Listeria Enrichment Broth 規(guī)格; 10ml*20支/包
FB2增菌液 英文名稱; FB2 Enrichment Broth 規(guī)格; 10ml*20支/包
改良磷酸鹽緩沖液(PSB) 英文名稱; Phosphate Buffered Saline 規(guī)格; 10ml*20支/包
消毒滅菌效果評(píng)價(jià)培養(yǎng)基
營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB) Nutrient Broth 250g
醇類中和劑管 9ml*20
醇類中和劑管(帶棉簽) 10ml*20
醛類中和劑管(帶棉簽) 10ml*20
鮭魚(yú)立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基(第二代) 用于沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng),沙門(mén)氏菌顯紫色沙門(mén)氏顯色培養(yǎng)基是公司改良的培養(yǎng)基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品和其它樣品中沙門(mén)氏菌的快速檢測(cè)。沙門(mén)氏菌顯紫色,大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色,其它細(xì)菌顯黃色或無(wú)色。用法稱取本品 13g 加入200ml蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱1-2分鐘。冷卻至45-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿。注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在37℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時(shí)。貯存制備好的平板可保存2-5天,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度2-8℃,注意避光保存。失效干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。操作步驟1、按、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;2、取1ml樣品液加入9ml RVS肉湯或其它選擇性增菌肉湯中, 36℃±1℃增菌培養(yǎng)24±2小時(shí);3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種到沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基上,做2個(gè)平板;4、36±1℃培養(yǎng)22-24h,沙門(mén)氏菌顯紫色,大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色,其它細(xì)菌顯黃色或無(wú)色;5、對(duì)可疑菌落可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,36±1℃培養(yǎng)12-16小時(shí),挑取單菌落做沙門(mén)氏菌全套生化試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)(本公司有生化鑒定管套裝)
MUCAP試劑 用該試劑檢測(cè)沙門(mén)氏菌的準(zhǔn)確率為97%以上用于沙門(mén)氏菌快速篩選4-甲基傘形酮辛脂(MUCAP)是SN 0332-94規(guī)定使用的試劑。沙門(mén)氏菌可特異的分解該試劑中的辛酯, 使4-甲基傘形酮游離.游離的4-甲基傘形酮用長(zhǎng)波紫外光燈照射發(fā)藍(lán)色熒光,從而使沙門(mén)氏菌得到證實(shí).培養(yǎng)基中加有蔗糖,可排除發(fā)酵的沙雷氏菌的干擾;顯熒光的菌落再做氧化酶試驗(yàn),可排除呈陽(yáng)性反應(yīng)的假單胞菌、嗜水氣單胞菌和志賀氏鄰單胞菌的干擾。用該試劑檢測(cè)沙門(mén)氏菌的準(zhǔn)確率為97%以上1.增菌:18-24小時(shí)(臨床檢驗(yàn)可直接進(jìn)行下一步—分離培養(yǎng)2.分離培養(yǎng):選用SS瓊脂或HE瓊脂分離培養(yǎng)24-48小時(shí)(視菌落生長(zhǎng)情況而定,一般24小時(shí)即可)。如選用SS瓊脂須在培養(yǎng)基中補(bǔ)加1%的蔗糖。3.樣品檢驗(yàn):于每個(gè)可疑菌落上加一滴制備好的試劑,如10分鐘內(nèi)于長(zhǎng)波紫外光下發(fā)藍(lán)色熒光則可初步判定沙門(mén)氏菌存在;4.排除假陽(yáng)性:用鉑針取部分菌落涂于試紙條上進(jìn)行測(cè)試,沙門(mén)氏菌為陰性(此過(guò)程可省略)采用此方法平均用2天時(shí)間,較其他方法快24小時(shí)以上
三糖鐵瓊脂(TSI) 生化培養(yǎng)基,用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))用途:用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選。成分(g/L)蛋白胨 15.0牛肉粉 3.0酵母粉 3.0氯化鈉 5.0月示胨 5.0乳糖 10.0葡萄糖 1.0蔗糖 10.0酚紅 0.025亞鐵 0.2硫代鈉 0.3瓊脂 12.0pH值7.4 ± 0.1 25℃用法稱取本品 64.5g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,加熱煮沸 1分鐘,分裝于 16mm× 150mm 試管,121℃高壓滅菌 15分鐘制成斜面長(zhǎng) 4-5cm,底部長(zhǎng)2-3cm。
沙門(mén)氏志賀氏增菌液 用于志賀氏菌和沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)用途:用于沙門(mén)氏菌、志賀氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。成分(g/L)月示胨 2.0蛋白胨 8.0牛肉浸粉 3.5酵母浸粉 2.0葡萄糖 2.0 10.0硫代鈉 10.0鎂 0.7鹽 0.7 4.0 0.1牛膽鹽 5.5去氧膽酸鈉 1.5煌綠 0.005pH值 7.1 ± 0.1 25℃用法稱取本品 50.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,水浴煮沸 2-3 分鐘,分裝無(wú)菌試管,每管 10ml,備用。注:無(wú)需高壓滅菌。
需要自備的器材:
1.鮭魚(yú)立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。