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產(chǎn)品名稱 | 家貓腎細(xì)胞；CATK1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63738 |
細(xì)胞名稱 家貓腎細(xì)胞；CATK1
形態(tài)特性: 上皮樣，多角形
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞來源于一雄性家貓的腎組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
Violanone
CAS No.：52250-38-1
中文名：
分子式：C17H16O6
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HAX1 造血干細(xì)胞特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Apigenin
NS5ATP9/KIAA0101 型肝炎病非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Apigenin
MFF 線粒體裂變因子MFF抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oleanolic acid
MICS1 生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體（源性蛋白2） 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oleanolic acid
MTCH1 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白60（早老素相關(guān)蛋白） 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oleanolic acid
MTCH2 線粒體載體同源蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Shikimic acid
MTFR1 線粒體裂變調(diào)節(jié)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Shikimic acid
MTP18 線粒體蛋白18抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Riociguat
硬脂基*基銨 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:OTAC 含量:色譜用，36～50目
硬脂基*基銨 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:STAB 含量:色譜用，26～35目
硬脂丁酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:TECH 含量:AR，99%
硬脂甘油酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:GMS 含量:GR，99.8%
硬脂甲酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Methylstearate 含量:高純，98%
硬酯鋁 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Aluminumtristearate 含量:BR，99%
硬酯鋅 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Stearicacidzincsalt 含量:GR，99%
優(yōu)巴拉爾 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Euparal 含量:AR，95%
優(yōu)凈 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumdichloroisocyanurate 含量:AR，99.5%
油 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Oleylalcohol 含量:SP
家貓腎細(xì)胞；CATK1YPDA培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于酵母菌增菌培養(yǎng)
1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于白色念球菌培養(yǎng)
大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）顆粒規(guī)格：300ml/袋*10用途：一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基，用于各種微生物的培養(yǎng)（GB/T16294-2010）
抗生素檢定培養(yǎng)基6號規(guī)格：250g用途：用于粘菌素等的效價測定
Casman瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于嗜血菌屬的分離培養(yǎng)
卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)（MYP）規(guī)格：250g用途：用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(shù)（GB.SN標(biāo)準(zhǔn)）
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