公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
胚肺二倍體細胞;HEL-2 | 貼壁生長 | EY-X63739 |
細胞名稱 胚肺二倍體細胞;HEL-2
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一女性胚胎的肺組織。1986年中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P17
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Luteolin 5,3'-dimethyl ether
CAS No.:62346-14-9
中文名:木犀草素-5,3'-二甲醚
分子式:C17H14O6
纈草三酯 訂購|咨詢 葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP) 規(guī)格: 20mg
吳茱萸 訂購|咨詢 葡萄糖變位酶(PGM2) 規(guī)格: 20mg
麝香草 訂購|咨詢 葡萄糖變位酶1(PGM1) 規(guī)格: 20mg
升3OL阿拉伯糖苷 訂購|咨詢 葡萄糖變位酶2樣蛋白1(PGM2L1) 規(guī)格: 20mg
芹菜素7OβD葡萄糖苷 訂購|咨詢 葡萄糖變位酶3(PGM3) 規(guī)格: 10mg
豬去氧膽 訂購|咨詢 葡萄糖變位酶5(PGM5) 規(guī)格: 20mg
芒果苷 訂購|咨詢 葡糖激酶(GNTK) 規(guī)格: 20mg
金石蠶苷 訂購|咨詢 棕櫚酰膜蛋白2(MPP2) 規(guī)格: 20mg
蓮心高 訂購|咨詢 棕櫚酰膜蛋白2(MPP2) 規(guī)格: 20mg
荷葉 訂購|咨詢 棕櫚酰膜蛋白5(MPP5) 規(guī)格: 20mg
橄欖苦苷 訂購|咨詢 棕櫚酰膜蛋白6(MPP6) 規(guī)格: 20mg
佛手柑內(nèi)酯 訂購|咨詢 棕櫚酰膜蛋白6(MPP6) 規(guī)格: 20mg
新綠原 訂購|咨詢 棕櫚酰膜蛋白6(MPP6) 規(guī)格: 20mg
膽固 訂購|咨詢 棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2) 規(guī)格: 20mg
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蟾它靈 訂購|咨詢 硬纖毛蛋白(STRC) 規(guī)格: 10mg
文多靈 訂購|咨詢 硬骨素(SOST) 規(guī)格: 20mg
白術(shù)內(nèi)酯III 訂購|咨詢 硬骨素(SOST) 規(guī)格: 20mg
PARL 骨骼肌細胞線粒體膜蛋白PARL抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Pheniramine Maleate
GYPB/CD235b 血型糖蛋白δ抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml FTase Substrate, Fluorogenic
FUT1 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Linaclotide
ICAM4/CD242 細胞間粘附分子4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml benzoylpaeoniflorin
RHCG RH血型C糖蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 3,4,5Tricaffeoylquinic acid
SLC14A1/RACH1 尿素轉(zhuǎn)運型糖蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Alisol A 24acetate
XKR1 膜轉(zhuǎn)運蛋白XK抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Alisol C monoacetate
ACSM3 ?;铣擅?抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sclareolide
油丁酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Butyloleate 含量:AR,98%
鈾試劑III 進口、國產(chǎn) 英文名稱:ArsenazoIII 含量:BR,96%
有機硅消泡劑 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Siliconedefoamer 含量:AR,99%
有水鐵 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Ferrichydroxide 含量:2.7N,99.7%
有效 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Validamycin 含量:BR,豬腸胃
莠去津 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Atrazine 含量:超純,100mM
右旋甘 進口、國產(chǎn) 英文名稱:LPhenylglycine 含量:BR,99%
右旋泛 進口、國產(chǎn) 英文名稱:SodiumDpantothenate 含量:CP,97.5%
右旋酒石 進口、國產(chǎn) 英文名稱:DTartaricacid 含量:AR,99.5%
右旋脯甲酯氫物 進口、國產(chǎn) 英文名稱:DProlinemethylesterhydrochloride 含量:BR,98%
胚肺二倍體細胞;HEL-2酵母浸出物葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于乳和乳制品中酵母菌和霉菌的計數(shù)
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:BR250g用途:營養(yǎng)非常豐富,用于各種細菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
10%化鈉胰蛋白胨大豆肉湯規(guī)格:10ml*20支/包用途:用于金黃色葡萄球菌的MPN測定及增菌培養(yǎng)
木糖賴氨脫氧膽鹽瓊脂規(guī)格:250g用途:用于藥品或生物制品中沙門氏菌選擇分離培養(yǎng)
百里香酚蘭規(guī)格:25g用途:微生物指示劑
緩沖蛋白胨水(BPW)規(guī)格:250g用途:用于配制腸球菌檢測用稀釋液
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。