產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 乳腺癌細(xì)胞；BC－028
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: BC－028乳腺癌細(xì)胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得，于2007年建立鑒定，是乳腺癌基礎(chǔ)研究和臨床研究的材料。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；50u/ml試劑胰島素
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C9
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品名稱 | 乳腺癌細(xì)胞；BC－028 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63677 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，產(chǎn)品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
Pterolactam
CAS No.：38072-88-7
中文名：
分子式：C5H9NO2
馬錢 訂購|咨詢 載脂蛋白A5(APOA5) 規(guī)格： 20mg
纖維蛋白溶酶原（牛血）（牛纖溶酶原） 訂購|咨詢 載脂蛋白B(APOB) 規(guī)格： 10U/支
黃精(滇黃精) 訂購|咨詢 載脂蛋白B(APOB) 規(guī)格： 2g
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聚磺醛雜質(zhì)C(m6磺銨) 訂購|咨詢 載脂蛋白B100(APOB100) 規(guī)格： 30mg
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山豆根 訂購|咨詢 載脂蛋白B100(APOB100) 規(guī)格： 2g
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奧美坦酯雜質(zhì)混合物 訂購|咨詢 載脂蛋白C1(APOC1) 規(guī)格：
人II、VII、IX和X 訂購|咨詢 載脂蛋白C1(APOC1) 規(guī)格： FII：16.06；FVII：15.03，F(xiàn)IX：10.4；FX：12.06 IU/支
地戈辛(Dig) 訂購|咨詢 載脂蛋白C1(APOC1) 規(guī)格： 3支/套，0.5ml/支
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無水二氫 訂購|咨詢 載脂蛋白C1(APOC1) 規(guī)格： 50mg
人參莖葉 訂購|咨詢 載脂蛋白C2(APOC2) 規(guī)格： 1g
二十碳五酯 訂購|咨詢 載脂蛋白C2(APOC2) 規(guī)格： 約1ml/支，10.3mg/支
ID4 DNA結(jié)合抑制因子4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Exemestane
IGF2R/M6PR/CD222/Mannose 6 Phosphate Receptor 胰島素樣生長因子2受體抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Amidopyrine/aminopyrine
KD1/Kv4.1 電壓門控通道Kv4.1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Angiotensin II
GIRK1 G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Vitamin D3
GIRK3/KJ9 G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Pazopanib HCl
KK9/KK3 敏感離子通道蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tiotropium bromide anhydrous
KN4 鈣激活通道蛋白4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Formoterol fumarate
LGR4/GPR48 G蛋白偶聯(lián)受體48抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Formoterol fumarate
青石棉 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Asbestosacidwashed 含量:AR，99.8%
青鮮素鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Maleichydrazidepotassiumsalt 含量:BR，98%
青鮮素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:MaleicHydrazide 含量:USP級，95%
輕質(zhì)碳鈣 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Calciumcarbonate 含量:CP，99%
輕質(zhì)碳鎂 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Magnesiumcarbonatehydroxide 含量:BR
氫桂皮 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:3Phenylpropanoicacid 含量:AR，98.5%
氫麥芽糖 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Maltitol 含量:BR，冷水可溶
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Hydroquinone 含量:ACS，99%
氫鎘 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cadmiumhydroxide 含量:CP，72%
氫鉛 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Leadhydroxide 含量:LR，95%
人乳腺癌細(xì)胞；BC－028緩沖蛋白胨水(BPW)規(guī)格：250g用途：用于阪崎桿菌前增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
哥倫比亞血瓊脂規(guī)格：用途：用于溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)（GB4789.11-2014）
酪蛋白葡萄糖瓊脂規(guī)格：250g用途：用于霉菌、酵母菌等的分離培養(yǎng)
緩沖動力-硝鹽培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的動力和硝鹽還原試驗
性肉湯規(guī)格：250g用途：用于性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗
沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于真菌的培養(yǎng)
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