綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
青春雙歧桿菌規(guī)格 | Bifidobacterium adolescentis | EY-J963222 |
資源名稱: 青春雙歧桿菌
種屬: Bifidobacterium adolescentis
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: yes
培養(yǎng)基: BBL液體培養(yǎng)基：蛋白胨 15.0g,葡萄糖 20.0g，酵母浸膏 20.g，可溶性淀粉 0.5g， 5.0g，L-半 0.5g，番茄浸粉 5.0g，肝浸粉 2.0g，吐溫80 1.0g，蒸餾水1L，pH6.6-7.0。115℃，20min。
生長(zhǎng)條件: 37℃，厭氧
存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
Eupenicillium│parvum 中文名稱：微細(xì)正青霉Eupenicillium│parvum分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0072生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%
Talaromyces│ruber 中文名稱：紅色籃狀菌Talaromyces│ruber分離基物:植物塊根提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分類(lèi)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
Eupenicillium│ochrosalmoneum 中文名稱：赭鮭色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum分離基物:玉米提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0072生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%
Salmonella│enrica subsp. enrica 中文名稱：腸沙門(mén)氏菌腸亞種Salmonella│enrica subsp. enrica提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:36℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%
Morganella morganii 中文名稱：摩氏摩根氏菌Morganella morganii提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件:37℃，好氧，24h。存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%
Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth 中文名稱：腸沙門(mén)氏菌腸亞種旺茲沃思血清型Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:36℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：99%
Tuberibacillus│calidus 中文名稱：熱生腫塊芽孢桿菌Tuberibacillus│calidus分離基物:堆肥提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0998生長(zhǎng)條件:50℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%
Bifidobacrium│bifidum 中文名稱：兩歧雙歧桿菌Bifidobacrium│bifidum分離基物:成年人腸道提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于益生菌類(lèi)食品。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0791生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%
青春雙歧桿菌規(guī)格葉測(cè)定培養(yǎng)基人肺成纖維細(xì)胞肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) ?？窠?jīng)素（35肽）
泛測(cè)定培養(yǎng)基人支氣管平滑肌細(xì)胞胃黏膜上皮ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) ?？窠?jīng)素（35肽）
游離測(cè)定培養(yǎng)基人氣管平滑肌細(xì)胞腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神經(jīng)素（35肽）
肌測(cè)定培養(yǎng)基人支氣管成纖維細(xì)胞腎系膜細(xì)胞ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) ?？窠?jīng)素（35肽）
多價(jià)蛋白胨酵母膏（PY）培養(yǎng)基人骨骼肌細(xì)胞膀胱上皮細(xì)胞rHBcAg 重組乙肝病核心抗原
營(yíng)養(yǎng)肉湯（不含糖）人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞膀胱平滑肌細(xì)胞rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重組乙肝病e抗原
亮綠乳糖培養(yǎng)基（BGL）人骨骼肌成肌細(xì)胞腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞rDen(rh-Dengue Virus) 多價(jià)重組人登革熱病診斷抗原
腸道菌增菌肉湯(EE)人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞rDen-2(rh-Dengue Virus) 重組人登革熱病2型診斷抗原
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