公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2 | 貼壁生長 | EY-X63660 |
細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: Vero-HCV-E2細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因,能穩(wěn)定表達(dá)E2蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C40
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Paniculidine B
CAS No.:97399-94-5
中文名:
分子式:C14H19NO2
佛手柑內(nèi)酯 訂購|咨詢 前列腺素E合酶(PTGES) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大葉茜草素 訂購|咨詢 前列腺素E合酶2(PTGES2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
貝母辛 訂購|咨詢 前列腺素E合酶2(PTGES2) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
5O基維斯阿米苷 訂購|咨詢 前列腺素E合酶2(PTGES2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人參皂苷Rb3 訂購|咨詢 前列腺素E受體2(EP2) 規(guī)格: HPLC≥97%;20mg
川芎嗪 訂購|咨詢 前列腺素E受體2(EP2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
熊果 訂購|咨詢 前列腺素E受體2(EP2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
金絲桃素 訂購|咨詢 前列腺素E受體3(EP3) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
大黃素 訂購|咨詢 前列腺素F2α(PGF2α) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
維生素K1 訂購|咨詢 前列腺素F受體(FP) 規(guī)格: 20mg
L蘇 訂購|咨詢 前列腺素F受體(FP) 規(guī)格: 20mg
異澤蘭黃素 訂購|咨詢 前列腺素H2(PGH2) 規(guī)格: 20mg
棕櫚 訂購|咨詢 前列腺素I合酶(PTGIS) 規(guī)格: 20mg
銀鍛苷 訂購|咨詢 前列腺素還原酶1(PTGR1) 規(guī)格: 20mg
異內(nèi)酯 訂購|咨詢 前列腺素還原酶2(PTGR2) 規(guī)格: 20mg
五味子 訂購|咨詢 前列腺凋亡應(yīng)答因子4(PAR4) 規(guī)格: 20mg
商陸皂苷 訂購|咨詢 前列腺蛋白類脂肪酶B(LIPB) 規(guī)格: 20mg
25氧基原人參三 訂購|咨詢 前列腺蛋白類脂肪酶B(LIPB) 規(guī)格: 10mg
EZH1/Histonelysine Nmethyltransferase EZH1 組蛋白賴N甲基EZH1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketotifen fumarate
phosphoKMT6/EZH2(Thr487) 抑癌蛋白EZH2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Ketotifen fumarate
SKALP/Elafin 彈性蛋白酶抑制劑抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketorolac
Epsti1/Epithelial Stromal Interaction 1 上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Leflunomide
EIG121 雌激素誘導(dǎo)基因121蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Leflunomide
FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein 細(xì)胞生長抑制基因39蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Levofloxacin Hemihidrated
FOLH1B 細(xì)胞生長抑制蛋白26抗體(前列腺特異性膜抗原樣蛋白) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Levofloxacin Hemihidrated
GCET2 生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Lornoxicam
馬尿酰組酰亮 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:NHippurylHisLeuhydrate 含量:BR,98%
嗎啉磺 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:MES 含量:IND
嗎啉磺 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:MESsodiumsalt 含量:BR
麥角甾 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ergosterol 含量:AR,99%
麥考酚 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Mycophenolicacid 含量:BR
麥芽酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:MaltosePhosphorylase 含量:BR,120u/mg
麥芽糖糊精 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Maltodextrin 含量:高純,95%
麥芽糖酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:γMDH 含量:BR,20u/ul
沒食子酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Propylgallate 含量:BR
玫瑰紅B 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:RhodamineB 含量:BR,98%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E21%NaCl規(guī)格:20支詳情介紹
三糖鐵管規(guī)格:5ml*20支/包用途:用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選
T1N3 肉湯規(guī)格:250g用途:用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))
CDC厭氧菌瓊脂規(guī)格:250g用途:用于厭氧菌分離培養(yǎng),使用時需添加羊血、化血紅素和1
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(PH6.5-6.7)規(guī)格:250g用途:用于藥品抗生素效價測定
TSA表面接觸皿(6.5cm)規(guī)格:10個/包用途:用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無菌檢測
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。