公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號(hào) |
腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞;769-P | 貼壁生長 | EY-X63872 |
細(xì)胞名稱 腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞;769-P
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 這株細(xì)胞來源于原發(fā)性透明細(xì)胞腺癌。細(xì)胞呈邊界不清楚的球形,高核質(zhì)比,有微絨毛和橋粒。可以在軟瓊脂中生長。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: P(25+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
博卡病IgG抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞;HCCLM3-GFP-LC3形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣bocavirus IgG antibody
博卡病IgM抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;4D2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣bocavirus IgM antibody
絡(luò)氨激酶受體-1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;15A7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣FLT-1
抗腦血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 肝癌細(xì)胞;HCC-LY5形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣anti-endothelial cell antibody
肌酐酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 肝癌細(xì)胞;HCC-LY10形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Creatininase aMidohydrolase
煙曲霉IgG抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;LW-5F3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Aspergillus funigatus IgG antibody
鋅指蛋白20檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 肝癌細(xì)胞;HCC-Y45形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣ZNF20
鋅指蛋白288抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;4F9形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Zinc finger protein 288 antibody
抗人組織谷胺酰胺轉(zhuǎn)移酶分泌型IGA抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;M10#01形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣human tissue transglutaminase secretory IgA antibodies
胰彈力蛋白酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;M18#13形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Pancreatic Elastase
三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;D9形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣ATP-binding cassette 7
抗Amphiphysin抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;3G12形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Amphiphysin antibody
黑色素細(xì)胞檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;1C形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣melanocyte
抗腮腺管抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;JEV/4D1C形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣anti-parotidduct Ab
游離蛋白C檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠肝癌細(xì)胞;LPC-H12形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Free Protein C
MAPRE1抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;M1095#2B10形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣MAPRE1 Antibody
γ-氨基丁受體IgG抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞;M05#3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣GABABR-IgG antibody
腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞;769-P去芹菜糖桔梗皂苷D中文別名:去芹糖桔梗皂苷D
英文名:Deapio platycodin D
CAS登錄號(hào):新品待定
分子量:1092.32
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色粉末
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:桔梗科植物桔梗(Platycodon grandiforus)
溶解性:易溶于水、,不溶于。
藥理藥效:具有抗炎、祛痰、保肝、降血糖等作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。